Diagnóstico por laboratorio

Se toma una muestra representativa del alimento sospechoso teniendo en cuenta que la distribución de la contaminación no es uniforme por lo que se aconseja tomar mas de una muestra, con un “n” (número de unidades de muestra) igual a 5. Se transportan rápidamente al laboratorio, se aconseja refrigerarlas, hasta el momento de procesarlas. Se realiza una dilución de 1:10 en diluyente apropiado ( agua peptonada, fosfato buffer salino, etc.) por cada muestra (n=5), se homogeiniza instrumentalmente 2 minutos aproximadamente a 2.000 rpm (Stomaker) y se preparan las diluciones seriadas, inoculándose en superficie un medio selectivo 104 cuantitativo en placa como el mannitol-egg yolk-polimixina agar ( MYP )( 5). Se incuban las placas a 35ºC durante 24 hrs, en caso de duda se dejan 24 hrs. más en incubación. Colonias típicas de color rosado rodeadas de un halo de precipitación por la lecitinasa fácilmente identificables hacen sospechar la presencia de B.cereus.

La búsqueda e identificación de B.cereus en el laboratorio clínico en los coprocultivos no es rutinaria. La incidencia de portadores sanos asintomáticos, en la población es frecuente, 14% de los adultos sanos tienen colonización transitoria gastrointestinal por lo tanto en las investigaciones de un brote los aislamientos cualitativos son insuficientes. Por este motivo, el análisis del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar el agente etiológico.

El aislamiento de un número significativo de unidades formadoras de colonias en el alimento y la recuperación de la misma cepa ( identificada por serovariedad, fagos, plásmidos, etc.) en las muestras clínicas (heces) de los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad dan la confirmación de que B.cereus está involucrado en el brote. En la práctica es raro que estos dos criterios se obtengan al mismo tiempo, es difícil aislar el microorganismo en las muestras clínicas en el número adecuado y así mismo obtener restos de alimentos sospechosos, donde se detecte cuantitativamente el microorganismo o su toxina. A los datos epidemiológicos (característica de la enfermedad, período de incubación, etc.) y a los resultados de laboratorio, hay que sumarle la inspección por personal especializado en tecnología alimentaria del local de producción de forma de poder llegar a una conclusión sobre el agente etiológico.

El aislamiento e identificación de B.cereus no es un análisis de rutina, realizándose la búsqueda e identificación en aquellos alimentos que por su naturaleza y por los datos clínicos ante una denuncia pudieran guiar a la posible presencia de este microorganismo. Por este motivo, la incidencia es baja en las intoxicaciones, si se suma que no siempre se obtiene restos de alimentos representativos de lo consumido por las personas intoxicadas. En nuestro país han sido identificados 3 brotes debido a este microorganismo en los últimos 9 años que afectaron un total de 115 personas, siendo los alimentos farináceos identificados en un 33% de los casos. El mayor número de personas afectadas en un solo brote, 65 son debido a una intoxicación en un comedor. De este total de casos notificados al sistema de Vigilancia epidemiológica solo un caso corresponde a los últimos 3 años con un total de 9 personas afectadas en el interior del país. 106 El Laboratorio de Microbiología de la IMM ha realizado estudios programados en especias y masas rellenas ( crema pastelera, crema, chocolate y sambayón) tratando de identificar la presencia de B.cereus .

De un total de mil masas analizadas, solo un 21% estaban contaminadas con B.cereus, la presencia de este microorganismo, no es deseable y puede ser perfectamente evitada. En el estudio realizado en especias se encontró que el 41% de las muestras analizadas fueron positivas para la presencia de B.cereus ; y 18 % B.cereus var. mycoides (Bergey’s classification) .De ellos el 33% de las muestras tenia valores superiores a 1.0 x 10 6 . Este valor representa un peligro potencial de intoxicación alimentaria para los consumidores.